Тест-системы в формате ДНК-микрочипов – современная технология, позволяющая проводить сотни и даже тысячи молекулярных исследований на одном носителе. Подобная мультиплексность обеспечивает существенный выигрыш по времени проведения тестирования, и сокращает количество манипуляций, осуществляемых лаборантом (в сравнении с методиками электрофоретической детекции или детекцией в режиме "реального времени").
Мы предлагаем:
- Функционализированные слайды для печати микрочипов
- Услуги по печати ДНК-микрочипов
- Разработку наборов для проведений исследований с использованием ДНК-микрочипов.
Наши технологии:
В микрочипах компании Алкор Био в качестве твердой фазы используется функционализированное предметное стекло (75х25х1 мм), на которое методом бесконтактной печати наносятся специфичные олигонуклеотиды, образующие альдегид-иминовые связи с поверхностью:
Подобранные условия предворительной очистки, силанизации и глутаризации поверхности позволяют получать слайды, выдерживающие гибридизацию в SDS-растворе при температурах до 60
0С.
Принцип анализа – «обратная» гибридизация продуктов двухстадийной полимеразной цепной реакции с иммобилизированными на микрочипе олигонуклеотидами, т.е. образование специфичных дуплексов.
Правильно подобранные мишени и условия гибридизации позволяют дискриминировать даже такие последовательности, как мутация 2184insA и ее дикий тип:
Процесс гибридизации может быть произведен в водяной бане с использованием гибридизационных камер оригинального дизайна (защищены патентом), ; либо в гибридизационной станции, например, компании Tecan.
Для детекции флуоресцентции дуплексов можно использовать сканеры LuxScan (Capital Bio), InnoScan 710 (Innopsis), PowerScanner (Tecan), ScanRI (PerkinElmer) или SureScan (Agilient). Используемый флуорофор - Cy5.
Полученное изображение может быть интерпретировано визуально, либо проанализировано программой «Мастер-Микрочип»:
На основе этих разработок производится диагностический набор "Муковисцидоз-БиоЧип", который определяет 25 мутаций в гене CFTR:
